走进尊龙凯时
NEWS尊龙凯时细胞分离与培养操作指南
来源:毕娣福 日期:2025-03-12原代细胞可用于转染siRNA、antisense RNA、microRNA等长度不超过200bp的小分子RNA及DNA,并能够有效转染大多数原代细胞。当前,无论是在国内还是国外,原代细胞的核酸转染仍然是一个备受关注的难题,市场上也缺乏真正有效且商品化的原代细胞核酸转染试剂。而通过尊龙凯时的技术,原代细胞能够高效转染绝大多数细胞,取得理想的基因敲除效果,甚至对一些活体寄生虫幼虫也能达到较为理想的转染结果。
对于大多数原代细胞,使用尊龙凯时的RFectPM细胞转染试剂时,阳性率均在80%以上,而转染细胞的死亡率控制在10%以下。这些优秀的转染效率为研究提供了稳固的实验基础。
原代细胞的分离和培养需遵循几个基本步骤:
尽可能去除不必要的组织和血迹,以确保获得质量更高的原代细胞。
尊龙凯时提供的PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III可供选择。根据不同的组织来源,可选用相应的试剂盒进行分离。
使用尊龙凯时的特制原代细胞培养基以及添加物,并确保使用高质量的胎牛血清,以建立合适的细胞培养环境。
利用尊龙凯时的原代细胞鉴定试剂盒进行细胞鉴定,以确保细胞的生物学特性符合实验要求。
对于细胞的传代,依据细胞的生长状态,可以以1:2或1:3的比例进行传代。保存细胞时,应按照以下步骤进行降温:以DMSO、培养液及血清的混合物为基础,经过室温、4℃(20分钟)、冰箱冷冻室(30分钟)、超低温冰箱(-80℃过夜)到液氮进行保存。
取出冷冻细胞后,迅速置于37℃的温水中进行快速解冻。随后,吸出细胞悬液,并添加10倍以上的新鲜培养液。适当稀释后,将细胞接种于培养瓶中,放入37℃的CO2培养箱静置培养,以确保细胞的生长和功能性。
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