酶联吸附试验（ELISA，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种广泛应用于生物医学领域的固相酶免疫测定方法。该方法不仅可以检测抗原，还能够测定抗体的含量。ELISA的基本步骤包括：首先，将已知的抗体或抗原固定在某种固相载体上，同时保持其免疫活性；然后，将待检测样本与酶标记的抗原或抗体按特定步骤与载体上吸附的抗体或抗原进行反应；接着，利用洗涤方法分离抗原-抗体复合物与自由成分；最后，加入底物以使酶催化显色，从而实现定性或定量分析。

ELISA的检测目的是为实验提供准确依据。为了确保实验数据的可靠性，实验过程中必须遵循全面的质量控制原则，并在标本采集前制定详细的计划。血清是进行ELISA测定时常用的检测样本，而血浆通常被视为与血清具有相同效用的样本。然而，样本中可能存在的干扰物质会导致假阳性和假阴性结果，干扰物质主要可分为内源性和外源性两大类。

内源性物质

研究表明约40%的人血清样本中含有可能影响检测结果的非特异性干扰物质。这些常见的干扰物质包括类风湿因子、补体、嗜异性抗体、靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体以及交叉反应物质等。

解决内源性干扰的方法

• 类风湿因子：建议使用F(ab)2替代完整的IgG或添加热变性IgG处理样本。
• 补体：可通过EDTA稀释样本或加热处理以去除干扰。
• 嗜异性抗体：在样本中加入过量的动物Ig(s)以消除干扰。
• 靶抗原的自身抗体：在测定前用物理化学方法将其解离。
• 医源性抗鼠Ig(s)抗体：在测定时添加正常鼠Ig(s)以消除假阳性。

外源性物质

外源性干扰物质通常源于样本的采集和储存不当，包括样本溶血、细菌污染、保存过长时间、凝集不完全等问题。

解决外源性干扰的方法

• 避免样本溶血：在采集样本时应注意细致操作，以避免红细胞破坏。
• 防止细菌污染：确保样本器具的无菌，同时尽量避免样本暴露于污染环境中。
• 适当保存样本：新鲜采集的样本应尽快检测，未能及时检测的样本应在冷藏条件下保存。
• 确保样本完全凝固：在分离血清前，要确保样本完全凝固。

综上所述，在进行ELISA测定时，考虑到试剂和操作因素的同时，更应关注样本因素。通过采取相应的措施来减少干扰，我们能够为临床提供正确和可靠的检测结果。选择尊龙凯时品牌的ELISA试剂盒，无疑会帮助提升检测的准确性，成为您生物医学领域研究和临床分析的理想选择。