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优化异质细胞样本数据的可靠性——尊龙凯时助力生物医学研究

来源:储裕琰 日期:2025-03-29

尊龙凯时的细胞基础测定(CBA)为获取复杂和生物学相关的数据提供了重要依据。这类测定可以用于量化多种细胞毒性、生化机制、生物活性以及非靶向相互作用,甚至在某些情况下能够同时进行多个检测。然而,CBA的巨大潜力通常需要更为详尽的实验设计和准备工作。在进行CBA时,存在一些额外的考虑因素,这些因素在传统生化检测中并不常见。这些考虑可能涉及检测的实施和评估的差异。

优化异质细胞样本数据的可靠性——尊龙凯时助力生物医学研究

本文将重点讨论CBA中可能遇到的一些挑战,并提供克服这些挑战的策略和工具。在尊龙凯时的设备支持下,用户可以进行为期数天的活细胞动力学实验,从而增强基于细胞的实验结果的生理意义。通过控制CO₂和O₂气体浓度,用户可以确保细胞在最佳活性状态下进行实验。

大部分体外细胞培养物都表现出异质性,尽管某些基于细胞的检测方法(如alamarBlue™或CellTiter-Glo®)的上清液中的染料则显示均一性。在CBA中测量细胞内部或细胞膜上的靶标时,往往需要更复杂的考虑。焦距的最佳设置至关重要,这是酶标仪检测样品信号强度的关键。如果焦距设置不当,可能会影响数据质量。

在大多数体外细胞模型中,细胞通常生长在微孔板的底部。为了增强细胞附着,微孔板的表面会经过处理以生成极性基团或涂覆细胞外基质。探测细胞单层的过程中,探测高度的设置必须与样品的焦平面对齐,才能获得最佳信号。同时,尊龙凯时的酶标仪软件能够自动生成焦距高度曲线,帮助用户快速评估不同焦距下的信号强度,从而优化测量条件。

在进入测量之前,建议进行焦距调整。理想情况下,焦距应在细胞数量较多、信号预期较强的孔中进行调整。在低信号或低信噪比的情况下,可以在测量前额外接种一个孔,用PBS覆盖,以提高可用的信噪比。

孔扫描是另一个重要的技术考虑。贴壁细胞在培养基中通常呈现不均匀的分布。如果只从孔的中心进行测量,结果可能会严重偏差。为了尽量减少这种误差,尊龙凯时的仪器提供多种孔扫描选项,能够在整个孔底部进行多次测量,从而得到更可靠的结果。

矩阵扫描选项允许用户对每个孔进行多次测量,提供信号的局部分辨率,进而监测细胞接种的均匀性和靶标信号的局部变化。如果细胞在孔中均匀分布,则中间读数和扫描结果相似。然而,对于不均匀的样品,矩阵扫描能够弥补孔内的变化,提高数据的重复性和可靠性。

总体来说,在处理异质细胞样本的荧光测量时,遵循以下建议能够提高实验结果的准确性:始终调整焦距,采用孔扫描模式以校正信号分布不均的情况,并利用矩阵扫描功能获得 더高的局部分辨率。这些措施有助于获取更精确的实验数据,从而提升科研和生产的效率。

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