尊龙凯时生物医疗酶联免疫吸附试剂盒使用说明

本试剂盒专为科学研究设计，不可用于医学诊断。该试剂盒采用
双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）进行分析。首先，在已预先包被的adropin（AD）抗体微孔中，依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过温育和彻底洗涤后，使用TMB底物显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，随后在酸的作用下转变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin（AD）的含量成正比。

随后，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. **血清**：使用不含热原和内毒素的试管，操作时尽量避免任何细胞刺激。收集血液后，以3000转离心10分钟迅速将血清与红细胞分离。

2. **血浆**：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转离心30分钟后取上清。

3. **细胞上清液**：以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. **组织匀浆**：将组织与适量生理盐水混合后捣碎，并以3000转离心10分钟取上清。

5. **保存**：如样本未及时检测，请按单次用量分装并冻存于-20℃，避免多次冻融。室温下解冻并确保样品均匀解冻。

自备物品

本试剂盒使用前，请准备好以下物品：酶标仪（450nm），高精度加样器及枪头（05-10μL、20-200μL等）以及37℃恒温箱。

操作注意事项

试剂盒应存放于2-8℃，使用前需在室温下平衡20分钟。取出的浓缩洗涤液可能会有结晶，属正常现象，应水浴加热至完全溶解后再使用。未用的板条应及时放回自封袋中密封保存。

浓度标准及操作步骤

浓度为0的S0号标准品可作为阴性对照；在操作时样本已被稀释5倍，最终结果需乘以5以获得实际浓度。严格按照说明书中所指明的时间、加液量及顺序进行温育所有液体组分使用前需充分摇匀。

在标准品孔中各添加不同浓度的标准品50μL，样本孔则添加待测样本10μL和样本稀释液40μL（空白孔不加）。最后加入HRP标记的检测抗体100μL并用封板膜封住反应孔，37℃下孵育60分钟。

检测及结果判断

弃去反应液，按照洗板方法重复清洗，每孔加入底物A和B各50μL，37℃避光孵育15分钟，最后加入终止液50μL，于15分钟内在450nm波长测定各孔OD值。通过Excel绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，依此计算样本浓度。

品质保证与免责声明

尊龙凯时产品具有以下优点：

• 准确性：标准品线性回归相关系数R值≥0.9900。
• 灵敏度：最低检测浓度小于10pg/mL。
• 特异性：不与其他可溶性结构交叉反应。
• 重复性：板间和板内变异系数均小于15%。

尊龙凯时强调，该试剂盒仅供研究使用，严禁用于临床实验或人体实验。如有不当使用，产生的一切后果由实验者自行承担，敬请理解。